محیط کشت RPMI

محیط کشت RPMI

محیط کشت RPMI یکی از پرکاربردترین محیط‌های کشت سلولی در تحقیقات بیولوژیکی است. این محیط کشت که به طور کامل Roswell Park Memorial Institute Medium نامیده می‌شود، در اصل برای کشت سلول‌های لنفوسیتی انسانی توسعه داده شده است اما کاربردهای گسترده‌ای در زمینه کشت سلول‌های مختلف دارد.

ترکیبات محیط کشت RPMI

محیط کشت RPMI ترکیبات متنوعی دارد که برای حفظ رشد و زنده‌مانی سلول‌ها در شرایط آزمایشگاهی طراحی شده‌اند. برخی از اجزای اصلی آن عبارتند از:

1. گلوکز: برای تأمین انرژی سلول‌ها.
2. بی‌کربنات سدیم (NaHCO3): به عنوان سیستم بافر برای حفظ pH.
3. اسیدهای آمینه: برای ساخت پروتئین‌ها و تأمین نیازهای سلولی.
4. ویتامین‌ها: مانند ویتامین B12 که در متابولیسم سلولی نقش کلیدی دارند.
5. نمک‌های معدنی: مانند کلرید پتاسیم و فسفات‌ها که برای حفظ تعادل یونی سلول ضروری هستند.
6. فنول رد: به عنوان شاخص pH.

ویژگی‌ها و مزایای RPMI

1. انعطاف‌پذیری بالا: قابلیت استفاده برای انواع مختلف سلول‌ها.
2. قابلیت تنظیم: امکان افزودن سرم (مانند FBS) یا مکمل‌های دیگر بسته به نیاز سلولی.
3. pH پایدار: بافر بی‌کربنات در RPMI، محیطی پایدار برای رشد سلول‌ها فراهم می‌کند.
4. سازگاری با شرایط کشت در CO₂: به طور خاص برای استفاده در انکوباتورهای دارای 5% دی‌اکسید کربن طراحی شده است.

نکات مهم در استفاده از RPMI

• استریل بودن: محیط باید استریل باشد تا از آلودگی جلوگیری شود.
• شرایط نگهداری: در دمای 2-8 درجه سانتی‌گراد نگهداری شود.
• افزودن مکمل‌ها: اغلب به RPMI مکمل‌هایی مانند سرم گاوی (FBS)، آنتی‌بیوتیک‌ها (پنی‌سیلین/استرپتومایسین) و گلوتامین اضافه می‌شود.
• کنترل pH: pH به دلیل وجود فنول رد به راحتی قابل نظارت است؛ تغییر رنگ نشان‌دهنده تغییر در pH محیط است.

انواع محیط کشت RPMI

• RPMI-1640: رایج‌ترین نوع این محیط کشت.
• RPMI بدون گلوکز: برای بررسی تأثیرات متابولیسم گلوکز بر سلول‌ها.
• RPMI بدون فنول رد: برای آزمایش‌های حساس به رنگ‌ها.

محیط کشت RPMI 1640 تولید شرکت مرک (Merck)، یکی از محصولات پرکاربرد در تحقیقات بیولوژیکی و زیست‌پزشکی است. این محیط کشت با کیفیت بالا برای رشد و نگهداری سلول‌های یوکاریوتی، به‌ویژه سلول‌های سیستم ایمنی (مانند لنفوسیت‌ها) و سلول‌های سرطانی طراحی شده است.

ویژگی‌های محیط کشت RPMI 1640 مرک

1. فرمولاسیون استاندارد:
   محیط RPMI 1640 مرک شامل گلوکز، نمک‌های معدنی، ویتامین‌ها، اسیدهای آمینه و فنول رد است که برای حفظ رشد و زنده‌مانی سلول‌ها ضروری هستند.
2. کیفیت بالا:
   محصولات مرک به دلیل کنترل دقیق کیفیت در فرآیند تولید، برای استفاده در آزمایش‌های حساس بسیار مناسب هستند.
3. سازگاری با مکمل‌ها:
   امکان افزودن سرم گاوی (FBS)، آنتی‌بیوتیک‌ها و گلوتامین برای بهینه‌سازی شرایط کشت.
4. استریل و آماده به کار:
   این محیط کشت استریل شده و آماده استفاده در آزمایشگاه ارائه می‌شود.
5. شاخص رنگی (فنول رد):
   تغییر رنگ محیط به دلیل وجود فنول رد، امکان نظارت بصری بر pH را فراهم می‌کند.

موارد استفاده محیط کشت RPMI مرک

1. تحقیقات سرطان‌شناسی:
   برای کشت انواع سلول‌های سرطانی، از جمله سلول‌های لنفوم و میلوم.
2. ایمنی‌شناسی:
   برای کشت سلول‌های ایمنی مانند لنفوسیت‌های T و B.
3. آزمایش‌های داروشناسی:
   بررسی تأثیر داروها و سمیت دارویی.
4. زیست‌شناسی مولکولی:
   استخراج RNA، DNA و پروتئین از سلول‌های کشت داده‌شده.
5. تولید آنتی‌بادی‌های مونوکلونال:
   RPMI 1640 محیط ایده‌آلی برای کشت سلول‌های هیبریدوم به منظور تولید آنتی‌بادی‌های مونوکلونال است.

مزایای استفاده از RPMI مرک

• اعتبار برند: مرک یکی از شرکت‌های پیشرو در تولید مواد شیمیایی و محیط‌های کشت است.
• پایداری و یکنواختی: فرمولاسیون دقیق و پایدار در هر بچ تولیدی.
• سازگاری گسترده: مناسب برای طیف وسیعی از انواع سلول‌ها.
• کنترل کیفیت دقیق: تضمین خلوص و استریلیته برای جلوگیری از آلودگی.

نکات مهم در استفاده از RPMI مرک

1. دمای نگهداری:
   محیط کشت باید در دمای 2-8 درجه سانتی‌گراد ذخیره شود.
2. افزودن مکمل‌ها:
   معمولاً برای رشد بهتر سلول‌ها باید مکمل‌هایی مانند سرم گاوی و گلوتامین به محیط اضافه شود.
3. تنظیم pH:
   برای جلوگیری از تغییرات غیرمنتظره، از انکوباتورهای CO₂ با درصد مناسب استفاده کنید.
4. استفاده طبق دستورالعمل:
   حتماً از دستورالعمل‌های مرک برای آماده‌سازی و استفاده از محیط پیروی کنید.

کد محصولات مرک برای RPMI 1640

شرکت مرک محصولات خود را با کدهای استاندارد عرضه می‌کند که به پژوهشگران اجازه می‌دهد دقیقاً محصول مورد نیاز خود را انتخاب کنند. در صورت نیاز می‌توانید از کاتالوگ آنلاین مرک استفاده کنید یا با نمایندگان رسمی تماس بگیرید.